薄层色谱分析免疫染色法在血清阴性APS中的应用

　　目的：在临床中，存在部分患者有提示APS的临床症状而传统抗磷脂抗体检测持续阴性。对于这部分病例，我们称之为血清阴性抗磷脂综合征（SN-APS）。本文探索薄层色谱分析（thin-layer chromatography，TLC）免疫染色法在检测SN-APS患者血清中抗体的应用意义。　　　　方法：收集36名SN-APS患者，19名APS患者，及18名SLE患者，20名抗HCV阳性患者的血清，以及32名健康对照的血清，应用TLC免疫染色法检测抗磷脂抗体。应用ELISA方法检测抗β2GP1抗体，抗膜联蛋白A2，抗膜联蛋白A5抗体，和抗凝血酶原抗体。Eahy926, 一个来自人体的内皮细胞系，用SN-APS患者的血清IgG成分孵育后，应用Western blot分析磷脂-白介素-1受体相关激酶（IRAK）和磷脂-NFκB，应用细胞荧光分析检测分VCAM-1，应用ELISA检测上清中组织因子（TF）。　　　　结果：TLC免疫染色法在58.3%SN-APS患者中检测到aPL：抗心磷脂抗体47.2%，抗溶血磷脂抗体41.7%，抗磷脂酰乙醇胺抗体30.5%。36名患者中有6人抗膜联蛋白抗体阳性。 Eahy926细胞系经SN-APS患者血清IgG孵育后诱导IRAK磷酸化，NF-κB激活，VCAM-1表面表达及TF释放。　　　　结论：TLC免疫染色法能够识别SN-APS患者血清中的aPL。此外，研究结果提示这些抗体在体外有促炎及促凝的作用。　　　　编辑点评　　　　近期的研究发现，在血清阴性APS患者血清中，应用新的靶抗原（主要是波形蛋白/心磷脂）以及新的检测方法（TLC）可检测到传统靶抗原及传统检测方法不能检测到的抗体。因此，APS表现多种多样，持续发展的新型检测方法将有助于检测不一而足的抗体。